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피부 관리 마사지를 위한 냉압착 유기농 호호바 오일 호호바 씨 캐리어 오일

천연 호호바 오일의 주요 성분은 팔미틱산, 에루크산, 올레산, 가돌레산입니다. 호호바 오일에는 비타민 E와 비타민 B 복합체와 같은 비타민도 풍부합니다.
호호바 식물의 액체 식물 왁스는 황금색입니다. 호호바 허브 오일은 독특한 견과류 향을 가지고 있으며 크림, 메이크업, 샴푸 등과 같은 개인 관리 제품에 선호되는 첨가물입니다. 호호바 허브 약용 오일은 일광화상, 건선 및 여드름의 피부에 직접 바를 수 있습니다. 순수 호호바 오일은 모발 성장도 촉진합니다.

세부 사항
아로마테라피 스킨 케어를 위한 천연 순수 유기농 라벤더 에센셜 오일

추출 또는 가공방법:증기 증류

증류 추출 부분:꽃

원산지 : 중국

응용 프로그램: 확산/아로마 테라피/마사지

유효기간:3년

맞춤형 서비스: 맞춤형 라벨 및 상자 또는 귀하의 요구 사항

인증:GMPC/FDA/ISO9001/MSDS/COA

세부 사항
피부 관리를 위한 100% 순수 천연 유기농 태산목 피질 오일 에센셜 오일

Hou Po의 향기는 즉시 씁쓸하고 날카로운 매운맛을 띠다가 점차적으로 깊고 시럽 같은 단맛과 따뜻함으로 시작됩니다.

Hou Po의 친화력은 흙과 금속 요소에 있으며, 쓴 따뜻함이 기 및 건조한 습기를 강하시키는 데 강하게 작용합니다. 이러한 성질 때문에 한방에서는 소화관의 정체와 축적을 완화하고, 폐를 막는 가래로 인한 기침과 천명을 완화하는 데 사용됩니다.

목련(Magnolia Officinials)은 쓰촨성, 후베이성 및 중국의 다른 지방의 산과 계곡에 자생하는 낙엽교목입니다. 한의학에서 사용되는 향이 강한 나무껍질은 줄기, 가지, 뿌리에서 벗겨낸 것으로 4~6월에 채취합니다. 두껍고 매끄러운 나무껍질은 기름이 많이 함유되어 있고 안쪽은 자줏빛을 띠며 수정 같은 광택이 납니다.

실무자는 축적된 물질을 분해하기 위한 블렌드의 탑노트 보완으로 Hou Po와 Qing Pi 에센셜 오일을 결합하는 것을 고려할 수 있습니다.

세부 사항
OEM 맞춤형 패키지 천연 Macrocephalae Rhizoma 오일

효율적인 화학요법제로서 5-FU(5-FU)는 위장관, 머리, 목, 흉부 및 난소의 악성 종양 치료에 널리 적용됩니다. 그리고 5-FU는 임상에서 대장암의 1차 치료제로 사용됩니다. 5-FU의 작용 메커니즘은 종양 세포에서 우라실 핵산이 티민 핵산으로 변환되는 것을 차단한 다음 DNA와 RNA의 합성 및 복구에 영향을 주어 세포 독성 효과를 달성하는 것입니다(Afzal et al., 2009; Ducreux et al. al., 2015; Longley 등, 2003). 그러나 5-FU는 또한 많은 환자를 괴롭히는 가장 흔한 부작용 중 하나인 화학요법 유발 설사(CID)를 유발합니다(Filho et al., 2016). 5-FU로 치료받은 환자의 설사 발생률은 최대 50~80%였으며 이는 화학요법의 진행과 효능에 심각한 영향을 미쳤습니다(Iacovelli et al., 2014; Rosenoff et al., 2006). 결과적으로, 5-FU 유발 CID에 대한 효과적인 치료법을 찾는 것이 매우 중요합니다.

현재 CID의 임상 치료에는 비약물 중재와 약물 중재가 도입되었습니다. 비약물 개입에는 합리적인 식단, 소금, 설탕 및 기타 영양소 보충이 포함됩니다. loperamide 및 octreotide와 같은 약물은 CID의 설사 치료에 일반적으로 사용됩니다(Benson et al., 2004). 또한 다양한 국가에서 고유한 치료법으로 CID를 치료하기 위해 민족의학도 채택되고 있습니다. 중의학(TCM)은 중국, 일본, 한국을 포함한 동아시아 국가에서 2000년 이상 시행되어 온 대표적인 민족의학이다(Qi et al., 2010). TCM에서는 화학요법 약물이 기 소비, 비장 결핍, 위 부조화 및 내생 습기를 유발하여 장의 전도 기능 장애를 초래할 수 있다고 주장합니다. TCM 이론에서 CID의 치료 전략은 주로 기 보충과 비장 강화에 의존해야 합니다(Wang et al., 1994).

말린 뿌리는Atractylodes 대두증코이즈. (오전) 그리고인삼CA 메이. PG(PG)는 기(氣)를 보충하고 비장을 강화하는 것과 동일한 효과를 갖는 한의학의 대표적인 약초이다(Li et al., 2014). AM과 PG는 일반적으로 기(氣)를 보충하고 비장을 튼튼하게 하여 설사를 치료하는 효과가 있는 한약재쌍(한약 궁합의 가장 간단한 형태)으로 사용된다. 예를 들어, AM과 PG는 Shen Ling Bai Zhu San, Si Jun Zi Tang과 같은 고전적인 설사약 처방으로 문서화되었습니다.타이핑 후이민 허지 주 팡(중국 송나라)와 Bu Zhong Yi Qi Tang 출신피 웨이 룬(중국 원나라) (그림 1). 여러 이전 연구에서는 세 가지 공식 모두 CID를 완화하는 능력을 가지고 있다고 보고했습니다(Bai et al., 2017; Chen et al., 2019; Gou et al., 2016). 또한 이전 연구에서는 AM과 PG만 함유한 Shenzhu 캡슐이 설사, 대장염(xiexie 증후군) 및 기타 위장 질환 치료에 잠재적인 효과가 있는 것으로 나타났습니다(Feng et al., 2018). 그러나 CID 치료에 AM과 PG의 효과와 메커니즘을 병용 또는 단독으로 논의한 연구는 없습니다.

이제 장내 미생물군은 TCM의 치료 메커니즘을 이해하는 데 잠재적인 요소로 간주됩니다(Feng et al., 2019). 현대 연구에 따르면 장내 미생물군은 장의 항상성을 유지하는 데 중요한 역할을 합니다. 건강한 장내 미생물군은 장 점막 보호, 신진대사, 면역 항상성 및 반응, 병원체 억제에 기여합니다(Thursby and Juge, 2017; Pickard et al., 2017). 장내 미생물총의 장애는 인체의 생리적, 면역 기능을 직간접적으로 손상시켜 설사와 같은 부작용을 유발합니다(Patel et al., 2016; Zhao and Shen, 2010). 연구에 따르면 5-FU는 설사를 하는 쥐에서 장내 미생물의 구조를 현저하게 변화시키는 것으로 나타났습니다(Li et al., 2017). 따라서 5-FU 유발 설사에 대한 AM과 PM의 효과는 장내 미생물에 의해 매개될 수 있습니다. 그러나 AM과 PG 단독 및 조합이 장내 미생물을 조절하여 5-FU 유발 설사를 예방할 수 있는지 여부는 아직 알려져 있지 않습니다.

AM과 PG의 설사 방지 효과와 기본 메커니즘을 조사하기 위해 5-FU를 사용하여 쥐의 설사 모델을 시뮬레이션했습니다. 여기서는 단일 투여 및 복합 투여(AP)의 잠재적 효과에 중점을 두었습니다.Atractylodes 대두증에센셜 오일(AMO)과인삼AM과 PG에서 각각 추출된 활성 성분인 총 사포닌(PGS)이 5-FU 화학 요법 후 설사, 장 병리 및 미생물 구조에 미치는 영향을 분석했습니다.

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피부 관리를 위한 100% 순수 천연 Eucommiae Foliuml 오일 에센셜 오일

Eucommia ulmoides(EU) (일반적으로 중국어로 "Du Zhong"이라고 함)은 중국 중부가 원산지인 작은 나무 속인 Eucommiaceae과에 속합니다.1]. 이 식물은 의학적 중요성 때문에 중국에서 대규모로 널리 재배되고 있습니다. 리그난, 이리도이드, 페놀계, 스테로이드 및 기타 화합물을 포함하여 약 112개의 화합물이 EU에서 분리되었습니다. 이 식물의 보완적인 허브 제제(예: 맛있는 차)는 일부 약효를 보여주었습니다. EU의 잎은 피질, 꽃, 과일과 관련된 활동이 더 높습니다.2,3]. EU의 잎은 뼈의 강도와 신체 근육을 강화시키는 것으로 보고되었습니다.4], 따라서 인간의 장수로 이어지고 다산을 촉진합니다 [5]. EU 잎으로 만든 맛있는 차 제조법은 지방을 감소시키고 에너지 대사를 강화시키는 것으로 보고되었습니다. 플라보노이드 화합물(루틴, 클로로겐산, 페룰산, 카페인산 등)은 EU 잎에서 항산화 활성을 나타내는 것으로 보고되었습니다.6].

EU의 식물화학적 특성에 관한 문헌은 충분하지만, EU의 나무껍질, 종자, 줄기 및 잎에서 추출된 다양한 화합물의 약리학적 특성에 대한 연구는 거의 없습니다. 본 리뷰 논문은 EU의 다양한 부분(나무껍질, 씨앗, 줄기, 잎)에서 추출된 다양한 화합물에 대한 자세한 정보와 과학적인 증거를 통해 이러한 화합물의 건강 증진 특성에 대한 향후 용도를 설명하고 참조 자료를 제공할 것입니다. EU의 적용을 위해.

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순수 천연 어성초 오일 어성초 오일 Lchthammolum 오일

대부분의 개발도상국에서는 인구의 70~95%가 일차 건강 관리를 위해 전통 의학에 의존하고 있으며, 이 중 85%의 사람들이 식물이나 그 추출물을 활성 물질로 사용합니다.[1] 식물에서 새로운 생물학적 활성 화합물을 찾는 것은 일반적으로 현지 실무자로부터 얻은 특정 민족 및 민간 정보에 따라 달라지며 여전히 약물 발견의 중요한 소스로 간주됩니다. 인도에서는 약 2000종의 약물이 식물 유래입니다.[2] 약용 식물 이용에 대한 광범위한 관심을 고려하여, 이번 검토에서는 약용 식물에 대한 검토가 이루어졌습니다.어성초 어성초툰브. 문헌에 나오는 식물학, 상업, 민족약리학, 식물화학 및 약리학 연구를 참조하여 최신 정보를 제공합니다.H. 어성초툰브. 가족에 속한다사우루라과일반적으로 중국 도마뱀 꼬리로 알려져 있습니다. 2개의 뚜렷한 화학형을 갖는 스토로니퍼성 뿌리줄기를 갖는 다년생 초본이다.3,4] 이 종의 중국 화학형은 4월부터 9월까지 인도 북동부의 야생 및 반야생 환경에서 발견됩니다.5,6,7]H. 어성초인도, 특히 아삼(Assam)의 브라마푸트라(Brahmaputra) 계곡에서 구할 수 있으며, 아삼의 다양한 부족에서 전통적으로 야채 형태뿐만 아니라 다양한 약용 목적으로 활용합니다.

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건강상의 이점

우엉 뿌리는 흔히 먹지만, 말려서 차로 우려낼 수도 있습니다. 이눌린의 공급원으로 효과적입니다.프리바이오틱스소화를 돕고 장 건강을 향상시키는 섬유질. 또한 이 뿌리에는 플라보노이드(식물 영양소)가 포함되어 있습니다.식물화학물질, 건강상의 이점이 있는 것으로 알려진 항산화제.

또한 우엉 뿌리는 다음과 같은 다른 이점도 제공할 수 있습니다.

만성 염증 감소

우엉 뿌리에는 케르세틴, 페놀산, 루테올린과 같은 다양한 항산화제가 함유되어 있어 세포를 보호하는 데 도움이 됩니다.자유 라디칼. 이 항산화제는 몸 전체의 염증을 줄이는 데 도움이 됩니다.

건강상의 위험

우엉 뿌리는 차로 먹거나 마셔도 안전한 것으로 간주됩니다. 그러나 이 식물은 독성이 있는 벨라도나 가지과 식물과 매우 유사합니다. 우엉은 믿을 수 있는 판매자에게서만 구입하시고, 직접 채취하는 것은 삼가하시는 것이 좋습니다. 또한 어린이나 임산부에게 미치는 영향에 대한 정보는 거의 없습니다. 어린이에게 우엉 뿌리를 사용하기 전이나 임신 중인 경우 의사와 상담하세요.

우엉 뿌리를 사용할 때 고려해야 할 다른 가능한 건강 위험은 다음과 같습니다.

탈수 증가

우엉 뿌리는 천연 이뇨제처럼 작용하여 탈수를 유발할 수 있습니다. 이뇨제나 기타 이뇨제를 복용하는 경우에는 우엉뿌리를 복용하지 마세요. 이러한 약을 복용하는 경우 탈수를 유발할 수 있는 다른 약물, 허브 및 성분을 알고 있는 것이 중요합니다.

알레르기 반응

데이지, 돼지풀, 국화에 민감하거나 알레르기 반응 병력이 있는 경우, 우엉 뿌리에 알레르기 반응을 일으킬 위험이 더 높습니다.

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동물 및 시험관 연구에서는 사사프라와 그 구성 요소의 잠재적인 항진균, 항염증 및 심혈관 효과를 조사했습니다. 그러나 임상 시험이 부족하고 사사프라스는 사용하기에 안전한 것으로 간주되지 않습니다. 사사프라스 뿌리 껍질과 기름의 주성분인 사프롤(Safrole)은 미국 식품의약국(FDA)에 의해 향료나 향료로의 사용이 금지되었으며 잠재적으로 발암성이 있으므로 내부 또는 외부적으로 사용해서는 안 됩니다. 사프롤은 "엑스터시" 또는 "몰리"라는 거리 이름으로도 알려진 3,4-메틸렌디옥시메탐페타민(MDMA)의 불법 생산에 사용되어 왔으며, 사프롤과 사사프라스 오일의 판매는 미국 마약단속국(Drug Enforcement Administration)에 의해 감시됩니다.

세부 사항
도매 대량 가격 100% 순수 Stellariae Radix 에센셜 오일(신규) 릴렉스 아로마테라피 유칼립투스 글로불루스

중국 약전(2020년 판)에서는 YCH의 메탄올 추출물이 20.0% 이상이어야 한다고 요구합니다.2], 다른 품질 평가 지표는 지정되지 않았습니다. 본 연구 결과, 야생 시료와 재배 시료의 메탄올 추출물 함량은 모두 약전 기준에 부합하며, 유의한 차이는 없는 것으로 나타났다. 따라서 해당 지수에 따르면 야생 시료와 재배 시료 사이에는 뚜렷한 품질 차이가 없었습니다. 그러나 야생 시료의 총 스테롤과 총 플라보노이드 함량은 재배 시료에 비해 유의하게 높았다. 추가 대사체 분석을 통해 야생 샘플과 재배 샘플 사이에 풍부한 대사산물 다양성이 밝혀졌습니다. 또한 97개의 상당히 다른 대사산물이 선별되었습니다.보충 표 S2. 이러한 상당히 다른 대사산물 중에는 활성 성분으로 보고된 β-시토스테롤(ID: M397T42)과 퀘르세틴 유도체(M447T204_2)가 있습니다. 트라이고넬린(M138T291_2), 베타인(M118T277_2), 푸스틴(M269T36), 로테논(M241T189), 아크티인(M557T165) 및 로간산(M399T284_2)과 같은 이전에 보고되지 않은 성분도 차등 대사산물에 포함되었습니다. 이러한 구성 요소는 항산화, 항염증, 자유 라디칼 제거, 항암 및 죽상경화증 치료에 다양한 역할을 하므로 YCH의 추정되는 새로운 활성 구성 요소가 될 수 있습니다. 유효성분의 함량에 따라 약재의 효능과 품질이 결정됩니다.7]. 요약하면, 유일한 YCH 품질 평가 지표인 메탄올 추출물에는 몇 가지 한계가 있으며, 보다 구체적인 품질 지표에 대한 추가 연구가 필요합니다. 야생 YCH와 재배 YCH 사이에는 총 스테롤, 총 플라보노이드 및 기타 많은 차등 대사산물 함량에 상당한 차이가 있었습니다. 그래서 잠재적으로 그들 사이에 약간의 품질 차이가 있었습니다. 동시에, YCH에서 새로 발견된 잠재적 활성 성분은 YCH의 기능적 기반 연구와 YCH 자원의 추가 개발에 중요한 참고 가치를 가질 수 있습니다.

우수한 품질의 한약재를 생산하기 위해서는 특정 원산지에서 진정한 약재의 중요성이 오랫동안 인식되어 왔습니다.8]. 고품질은 정품 약재의 필수 속성이며, 서식지는 해당 소재의 품질에 영향을 미치는 중요한 요소입니다. YCH가 약으로 사용되기 시작한 이래 오랫동안 야생 YCH가 지배해 왔습니다. 1980년대 닝샤에서 YCH가 성공적으로 도입되고 국산화된 후, YCH의 원료 공급원은 점차 야생에서 재배된 YCH로 전환되었습니다. YCH 소스에 대한 이전 조사에 따르면 [9]와 우리 연구팀의 현장조사 결과, 재배약재와 야생약재의 분포지역에 상당한 차이가 있는 것으로 나타났다. 야생 YCH는 주로 내몽골 건조지대와 닝샤 중부 지역에 인접한 산시성 닝샤 회족 자치구에 분포합니다. 특히 이들 지역의 사막 대초원은 YCH 성장에 가장 적합한 서식지입니다. 이에 반해 재배되는 YCH는 중국 최대의 재배생산기지가 된 퉁신현(재배Ⅰ) 및 그 주변지역, 펑양현(재배Ⅱ) 등 야생분포지역 남쪽에 주로 분포한다. 는 좀 더 남쪽 지역에 위치하고 있으며 YCH를 재배하는 또 다른 생산지입니다. 또한, 위 두 경작지의 서식지는 사막 초원이 아닙니다. 따라서 생산 방식 외에도 야생 YCH와 재배 YCH의 서식지에도 상당한 차이가 있습니다. 서식지는 한약재의 품질에 영향을 미치는 중요한 요소이다. 다양한 서식지는 식물 내 2차 대사산물의 형성과 축적에 영향을 미쳐 의약품의 품질에도 영향을 미칩니다.10,11]. 따라서 본 연구에서 발견한 총 플라보노이드와 총 스테롤의 함량과 53종의 대사산물 발현의 유의미한 차이는 현장 관리와 서식지의 차이에 따른 결과일 수 있다.

환경이 약재의 품질에 영향을 미치는 주요 방법 중 하나는 원료 식물에 스트레스를 가하는 것입니다. 적당한 환경 스트레스는 2차 대사산물의 축적을 자극하는 경향이 있습니다.12,13]. 성장/분화 균형 가설은 영양분 공급이 충분하면 식물이 주로 자라는 반면, 영양분이 부족하면 식물은 주로 분화하여 더 많은 2차 대사산물을 생산한다는 것입니다.14]. 물 부족으로 인한 가뭄 스트레스는 건조한 지역의 식물이 직면하는 주요 환경 스트레스입니다. 본 연구에서 재배된 YCH의 수질은 더 풍부하여 연간 강수량은 야생 YCH에 비해 상당히 높습니다(재배 I의 급수량은 야생의 약 2배, 재배 II의 급수량은 야생의 약 3.5배) ). 또한, 야생환경의 토양은 사질토이지만, 농경지의 토양은 점토질 토양이다. 점토에 비해 모래 토양은 보수 능력이 낮고 가뭄 스트레스를 악화시킬 가능성이 더 높습니다. 동시에 재배과정에 물주기가 동반되는 경우가 많아 가뭄스트레스 정도도 낮았다. 야생 YCH는 가혹한 자연 건조 서식지에서 자라기 때문에 더 심각한 가뭄 스트레스를 겪을 수 있습니다.

삼투압 조절은 식물이 가뭄 스트레스에 대처하는 중요한 생리적 메커니즘이며, 알칼로이드는 고등 식물에서 중요한 삼투압 조절제입니다.15]. 베타인은 수용성 알칼로이드 4차 암모늄 화합물이며 삼투압 방지제 역할을 할 수 있습니다. 가뭄 스트레스는 세포의 삼투압 잠재력을 감소시킬 수 있는 반면, 삼투압 방지제는 생물학적 거대분자의 구조와 완전성을 보존 및 유지하고 가뭄 스트레스로 인한 식물의 피해를 효과적으로 완화합니다.16]. 예를 들어, 가뭄 스트레스 하에서 사탕무와 Lycium barbarum의 베타인 함량이 크게 증가했습니다.17,18]. 트리고넬린은 세포 성장 조절제이며, 가뭄 스트레스 하에서는 식물 세포 주기의 길이를 연장하고 세포 성장을 억제하며 세포 부피 감소를 초래할 수 있습니다. 세포 내 용질 농도의 상대적 증가는 식물이 삼투압 조절을 달성하고 가뭄 스트레스에 저항하는 능력을 향상시킬 수 있게 해줍니다.19]. 지아엑스 [20]는 가뭄 스트레스가 증가함에 따라 황기(중국 전통 의학의 원천)가 삼투압을 조절하고 가뭄 스트레스에 저항하는 능력을 향상시키는 작용을 하는 트라이고넬린을 더 많이 생성한다는 사실을 발견했습니다. 플라보노이드는 또한 가뭄 스트레스에 대한 식물의 저항성에 중요한 역할을 하는 것으로 나타났습니다.21,22]. 많은 연구에서 적당한 가뭄 스트레스가 플라보노이드 축적에 도움이 된다는 것이 확인되었습니다. Lang Duo-Yong et al. [23] 현장에서 수분 보유 용량을 제어하여 YCH에 대한 가뭄 스트레스의 영향을 비교했습니다. 가뭄 스트레스는 어느 정도 뿌리의 성장을 억제하는 것으로 나타났으나, 중간 및 심한 가뭄 스트레스(밭 보수 능력 40%)에서는 YCH의 총 플라보노이드 함량이 증가한 것으로 나타났습니다. 한편, 가뭄 스트레스 하에서 피토스테롤은 세포막 유동성과 투과성을 조절하고 수분 손실을 억제하며 스트레스 저항성을 향상시키는 역할을 할 수 있습니다.24,25]. 따라서 야생 YCH에서 총 플라보노이드, 총 스테롤, 베타인, 트리고넬린 및 기타 2차 대사산물의 축적 증가는 고강도 가뭄 스트레스와 관련이 있을 수 있습니다.

본 연구에서는 야생 YCH와 재배 YCH 간에 유의미한 차이가 있는 것으로 밝혀진 대사산물에 대해 KEGG 경로 농축 분석을 수행했습니다. 강화된 대사산물에는 아스코르베이트 및 알다레이트 대사, 아미노아실-tRNA 생합성, 히스티딘 대사 및 베타-알라닌 대사 경로에 관여하는 대사산물이 포함되었습니다. 이러한 대사 경로는 식물의 스트레스 저항 메커니즘과 밀접한 관련이 있습니다. 그 중 아스코르브산 대사는 식물의 항산화 생산, 탄소 및 질소 대사, 스트레스 저항성 및 기타 생리적 기능에 중요한 역할을 합니다.26]; 아미노아실-tRNA 생합성은 단백질 형성에 중요한 경로이다.27,28], 이는 스트레스 저항성 단백질의 합성에 관여합니다. 히스티딘과 β-알라닌 경로는 모두 환경 스트레스에 대한 식물의 내성을 향상시킬 수 있습니다.29,30]. 이는 또한 야생 YCH와 재배 YCH 사이의 대사산물의 차이가 스트레스 저항 과정과 밀접하게 관련되어 있음을 나타냅니다.

토양은 약용 식물의 성장과 발달을 위한 물질적 기반입니다. 토양 속의 질소(N), 인(P), 칼륨(K)은 식물의 성장과 발육에 중요한 영양원입니다. 토양 유기물에는 또한 약용 식물에 필요한 N, P, K, Zn, Ca, Mg 및 기타 거대 원소와 미량 원소가 포함되어 있습니다. 영양소의 과잉 또는 결핍 또는 불균형한 영양소 비율은 약재의 성장 및 발달과 품질에 영향을 미치며, 식물마다 영양소 요구량이 다릅니다.31,32,33]. 예를 들어, 낮은 N 스트레스는 Isatis indigotica에서 알칼로이드 합성을 촉진했으며 Tetrastigma hemsleyanum, Crataegus pinnatifida Bunge 및 Dichondra repens Forst와 같은 식물에서 플라보노이드 축적에 유익했습니다. 대조적으로, N이 너무 많으면 Erigeron breviscapus, Abrus cantoniensis 및 Ginkgo biloba와 같은 종에서 플라보노이드의 축적을 억제하고 약재의 품질에 영향을 미쳤습니다.34]. P비료의 시용은 우랄감초의 글리시리진산과 디히드로아세톤의 함량을 증가시키는 데 효과적이었다.35]. 시비량이 0·12kg·m−2를 초과하면 투실라고 파르파라의 총 플라보노이드 함량이 감소하였다[36]. P비료의 시용은 한약재인 rhizoma 다각형의 다당류 함량에 부정적인 영향을 미쳤습니다.37], 그러나 K 비료는 사포닌 함량을 높이는 데 효과적이었습니다 [38]. 450kg·hm−2K 비료를 시비한 것이 2년근 죽칠인삼의 성장과 사포닌 축적에 가장 좋았다.39]. N:P:K=2:2:1의 비율에서 열수추출물, 하르파자이드, 하르파고사이드의 총 함량이 가장 높았다.40]. N, P 및 K의 비율이 높을수록 포고스테몬 카블린의 성장을 촉진하고 휘발성 오일의 함량을 높이는 데 유리했습니다. N, P, K의 비율이 낮아 포고스테몬캐블린줄기잎오일의 주요 유효성분 함량을 높였습니다.41]. YCH는 불모지 토양에 강한 식물이며 N, P 및 K와 같은 영양소에 대한 특정 요구 사항이 있을 수 있습니다. 이 연구에서 재배된 YCH와 비교하여 야생 YCH 식물의 토양은 상대적으로 불모지였습니다. 유기물의 총 N, 총 P 및 총 K는 각각 재배 식물의 약 1/10, 1/2, 1/3 및 1/3이었습니다. 따라서 토양 영양분의 차이는 재배 YCH와 야생 YCH에서 검출된 대사산물 간의 차이에 대한 또 다른 이유일 수 있습니다. 웨이바오 마 외. [42] 일정량의 N 비료와 P 비료를 시용하면 종자의 수확량과 품질이 크게 향상되는 것으로 나타났습니다. 그러나 YCH의 품질에 대한 영양원소의 영향은 명확하지 않으며 약재의 품질을 향상시키기 위한 시비 조치에 대한 추가 연구가 필요합니다.

한약재는 “좋은 서식지는 수확량을 촉진하고, 불리한 서식지는 품질을 향상시킨다”는 특징을 가지고 있습니다.43]. 야생에서 재배된 YCH로 점진적으로 전환하는 과정에서 식물의 서식지는 건조하고 척박한 사막 대초원에서 물이 더 풍부한 비옥한 농지로 바뀌었습니다. 재배된 YCH의 서식지가 우수하고 수확량이 높아 시장 수요를 충족하는 데 도움이 됩니다. 그러나 이 우수한 서식지는 YCH의 대사산물에 상당한 변화를 가져왔습니다. 이것이 YCH의 품질 향상에 도움이 되는지 여부와 과학 기반 재배 방법을 통해 YCH의 고품질 생산을 달성하는 방법에 대해서는 추가 연구가 필요합니다.

모의 서식지 재배는 특정 환경 스트레스에 대한 식물의 장기적인 적응에 대한 지식을 바탕으로 야생 약용 식물의 서식지와 환경 조건을 시뮬레이션하는 방법입니다.43]. 야생 식물에 영향을 미치는 다양한 환경 요인, 특히 진정한 약재의 원천으로 사용되는 식물의 원래 서식지를 시뮬레이션함으로써 이 접근 방식은 과학적 설계와 혁신적인 인간 개입을 사용하여 한약 식물의 성장과 2차 대사의 균형을 맞춥니다.43]. 이 방법은 고품질 의약 재료 개발을 위한 최적의 장치를 마련하는 것을 목표로 합니다. 모의 서식지 재배는 약력학적 기초, 품질 지표 및 환경 요인에 대한 반응 메커니즘이 불분명한 경우에도 YCH의 고품질 생산을 위한 효과적인 방법을 제공해야 합니다. 따라서 우리는 YCH의 재배 및 생산에 대한 과학적 설계 및 현장 관리 조치가 건조, 불모 및 모래 토양 조건과 같은 야생 YCH의 환경적 특성을 참조하여 수행되어야 한다고 제안합니다. 동시에 연구자들이 YCH의 기능성 소재 기반과 품질 지표에 대해 더욱 심층적인 연구를 수행할 것으로 기대됩니다. 이러한 연구는 YCH에 대한 보다 효과적인 평가 기준을 제공하고 업계의 고품질 생산과 지속 가능한 발전을 촉진할 수 있습니다.

세부 사항
허벌 프럭투스 아모미 오일 천연 마사지 디퓨저 1kg 대용량 Amomum villosum 에센셜 오일

Zingiberaceae 계통은 풍부한 휘발성 오일과 그 구성원 종의 방향성으로 인해 타감작용 연구에서 점점 더 주목을 받고 있습니다. 이전 연구에서는 Curcuma zedoaria(zedoary)의 화학물질이 [40], Alpinia zerumbet (Pers.) BLBurtt & RMSm. [41] 및 Zingiber officinale Rosc. [42] 생강과의 식물은 옥수수, 상추, 토마토의 종자 발아 및 묘목 성장에 타감작용 효과를 가지고 있습니다. 우리의 현재 연구는 A. villosum(Zingiberaceae 계통의 구성원)의 줄기, 잎 및 어린 열매에서 나오는 휘발성 물질의 타감작용 활성에 대한 첫 번째 보고서입니다. 줄기, 잎, 어린 열매의 기름 생산량은 각각 0.15%, 0.40%, 0.50%로 과일이 줄기와 잎보다 더 많은 양의 휘발성 기름을 생산하는 것으로 나타났다. 줄기 휘발성 기름의 주성분은 β-pinene, β-phellandrene, α-pinene으로 잎기름의 주요 화학성분인 β-pinene, α-pinene(모노테르펜 탄화수소)과 유사한 패턴을 보였다. 반면 어린 과일의 기름에는 보르닐 아세테이트와 장뇌(산소화 모노테르펜)가 풍부했습니다. 결과는 Do N Dai의 연구 결과에 의해 뒷받침되었습니다.30,32] 및 후이 아오 [31] 그는 A. villosum의 여러 기관에서 오일을 확인했습니다.

다른 종에서 이들 주요 화합물의 식물 성장 억제 활성에 대한 여러 보고가 있었습니다. Shalinder Kaur는 유칼립투스의 α-피넨이 1.0μL 농도에서 Amaranthus viridis L.의 뿌리 길이와 새싹 높이를 현저하게 억제한다는 사실을 발견했습니다.43], 또 다른 연구에서는 α-피넨이 초기 뿌리 성장을 억제하고 활성 산소종 생성 증가를 통해 뿌리 조직의 산화적 손상을 유발한다는 사실이 밝혀졌습니다.44]. 일부 보고서에서는 β-피넨이 막 완전성을 파괴함으로써 용량 의존적 반응 방식으로 시험 잡초의 발아 및 묘목 성장을 억제한다고 주장했습니다.45], 식물 생화학을 변경하고 퍼옥시다제 및 폴리페놀 옥시다제의 활성을 강화합니다.46]. β-Phellandrene은 600ppm 농도에서 Vigna unguiculata (L.) Walp의 발아 및 성장을 최대로 억제하는 것으로 나타났습니다.47], 반면에 250 mg/m3 농도에서는 녹나무가 Lepidium sativum L.의 유근과 싹의 성장을 억제했습니다.48]. 그러나 보르닐아세테이트의 타감작용 효과를 보고한 연구는 부족합니다. 우리 연구에서 뿌리 길이에 대한 β-피넨, 보르닐 아세테이트 및 장뇌의 타감작용 효과는 α-피넨을 제외한 휘발성 오일보다 약한 반면, α-피넨이 풍부한 잎 오일은 해당 휘발성 오일보다 식물 독성이 더 컸습니다. A. villosum의 줄기와 열매에서 추출한 오일로, 두 가지 발견 모두 α-피넨이 이 종의 타감작용에 중요한 화학물질일 수 있음을 나타냅니다. 동시에, 그 결과는 과일유에 풍부하지 않은 일부 화합물이 식물 독성 효과의 생성에 기여할 수 있음을 암시하며, 이는 향후 추가 연구가 필요한 발견입니다.

정상적인 조건에서 타감화학물질의 타감작용 효과는 종에 따라 다릅니다. Jianget al. Artemisia sieversiana가 생산한 에센셜 오일이 Medicago sativa L., Poa annua L. 및 Pennisetum alopecuroides (L.) Spreng보다 Amaranthus retroflexus L.에 더 강력한 효과를 발휘한다는 사실을 발견했습니다. [49]. 또 다른 연구에서는 Lavandula angustifolia Mill의 휘발성 오일이 사용되었습니다. 다양한 식물 종에 대해 다양한 정도의 식물 독성 효과를 나타냈습니다. Lolium multiflorum 램. 오이 묘목의 하배축 성장은 가장 민감한 수용체 종으로, 1μL/mL 오일 투여량에서 각각 87.8%와 76.7%까지 억제되었지만 오이 묘목의 하배축 성장은 거의 영향을 받지 않았습니다.20]. 우리의 결과는 또한 L. sativa와 L. perenne 사이에 A. villosum 휘발성 물질에 대한 민감도에 차이가 있음을 보여주었습니다.

동일한 종의 휘발성 화합물과 에센셜 오일은 성장 조건, 식물 부위 및 검출 방법에 따라 양적 및/또는 질적으로 다양할 수 있습니다. 예를 들어, 보고서에 따르면 피라노이드(10.3%)와 β-카리오필렌(6.6%)은 삼부쿠스 니그라(Sambucus nigra) 잎에서 방출되는 휘발성 물질의 주요 화합물인 반면, 벤즈알데히드(17.8%), α-불네센(16.6%) 및 테트라코산은 (11.5%)가 잎에서 추출한 오일에 풍부하게 함유되어 있습니다.50]. 우리의 연구에서, 신선한 식물 재료에서 방출된 휘발성 화합물은 추출된 휘발성 오일보다 테스트 식물에 대해 더 강한 타감작용 효과를 나타냈으며, 반응의 차이는 두 가지 제제에 존재하는 타감화학물질의 차이와 밀접하게 관련되어 있습니다. 휘발성 화합물과 오일의 정확한 차이점은 후속 실험에서 추가 조사가 필요합니다.

휘발성 오일이 첨가된 토양 샘플의 미생물 다양성 및 미생물 군집 구조의 차이는 미생물 간의 경쟁뿐만 아니라 토양 내 휘발성 오일의 독성 효과 및 지속 기간과 관련이 있습니다. 보쿠와 리오티리 [51] 경작된 토양(150g)에 4가지 에센셜 오일(0.1mL)을 각각 적용하면 토양 샘플의 호흡이 활성화되고 심지어 오일의 화학적 구성도 다르다는 사실이 밝혀졌습니다. 이는 식물 오일이 탄소 및 에너지원으로 사용됨을 시사합니다. 발생하는 토양미생물. 현재 연구에서 얻은 데이터는 A. villosum 전체 식물의 오일이 오일 첨가 후 14일까지 토양 곰팡이 종 수의 명백한 증가에 기여했음을 확인했습니다. 이는 오일이 더 많은 탄소원을 제공할 수 있음을 나타냅니다. 토양 곰팡이. 또 다른 연구에서는 Thymbra capitata L.(Cav) 오일을 첨가하여 일시적인 변화가 발생한 후 토양 미생물이 초기 기능과 바이오매스를 회복했지만 가장 높은 용량의 오일(토양 1g당 0.93μL 오일)을 발견했다고 보고했습니다. 토양 미생물이 초기 기능을 회복하는 것을 허용하지 않았습니다.52]. 현재 연구에서는 다양한 일자와 농도로 처리한 후 토양에 대한 미생물학적 분석을 기반으로 토양 박테리아 군집이 더 많은 일 후에 회복될 것이라고 추측했습니다. 대조적으로, 곰팡이 미생물군은 원래 상태로 돌아갈 수 없습니다. 다음 결과는 이 가설을 확증합니다. 토양 곰팡이 미생물군집 구성에 대한 오일 고농도의 뚜렷한 효과는 주좌표분석(PCoA)에 의해 밝혀졌으며 히트맵 프레젠테이션을 통해 토양의 곰팡이 군집 구성이 다시 확인되었습니다. 속 수준에서 3.0 mg/mL 오일(즉, 토양 1g당 0.375 mg 오일)로 처리한 것은 다른 처리와 상당히 달랐습니다. 현재, 모노테르펜 탄화수소 또는 산소화 모노테르펜의 첨가가 토양 미생물 다양성 및 군집 구조에 미치는 영향에 대한 연구는 여전히 부족합니다. 몇몇 연구에서는 α-피넨이 낮은 수분 함량 하에서 토양 미생물 활성과 Methylophilaceae(메틸영양체 그룹, 프로테오박테리아)의 상대적 풍부함을 증가시켜 더 건조한 토양에서 탄소원으로 중요한 역할을 한다고 보고했습니다.53]. 마찬가지로, 15.03% α-피넨을 함유한 A. villosum 전체 식물의 휘발성 오일(보충 표 S1), 1.5 mg/mL 및 3.0 mg/mL에서 프로테오박테리아의 상대적 존재비가 분명히 증가했는데, 이는 α-피넨이 토양 미생물의 탄소원 중 하나로 작용할 수 있음을 시사합니다.

A. villosum의 여러 기관에서 생성된 휘발성 화합물은 L. sativa 및 L. perenne에 대해 다양한 정도의 타감작용 효과를 나타냈는데, 이는 A. villosum 식물 부분에 포함된 화학 성분과 밀접한 관련이 있습니다. 휘발성 오일의 화학적 조성은 확인되었지만 A. villosum이 실온에서 방출하는 휘발성 화합물은 알려져 있지 않으므로 추가 조사가 필요합니다. 더욱이, 서로 다른 타감화학물질 간의 시너지 효과도 고려할 가치가 있습니다. 토양 미생물 측면에서, 휘발성 오일이 토양 미생물에 미치는 영향을 포괄적으로 탐색하려면 더 심층적인 연구를 수행해야 합니다. 즉, 휘발성 오일의 처리 시간을 연장하고 토양 내 휘발성 오일의 화학적 조성 변화를 식별해야 합니다. 다른 날에.

세부 사항
양초 및 비누 제조용 순수 Artemisia capillaris 오일 리드 버너 디퓨저의 새로운 도매 디퓨저 에센셜 오일

설치류 모델 디자인

동물을 무작위로 각각 15마리의 생쥐로 구성된 5개 그룹으로 나누었습니다. 대조군과 모델군 마우스에는 위관 영양 공급을 받았습니다.참기름6일 동안. 양성 대조군 마우스에게 비펜데이트 정제(BT, 10 mg/kg)를 6일 동안 위관 영양 공급했습니다. 실험군에는 참기름에 용해된 AEO 100 mg/kg 및 50 mg/kg을 6일간 처리하였다. 6일차에는 대조군에 참기름을 처리하였고, 다른 모든 그룹에는 참기름에 함유된 0.2% CCl4(10 ml/kg)를 단회 투여하였다.복강내 주사. 그런 다음 마우스를 물 없이 금식시키고 안구후 혈관에서 혈액 샘플을 수집했습니다. 수집된 혈액을 3000×에서 원심분리했습니다.g10분 동안 혈청을 분리합니다.경추 탈구혈액을 채취한 후 즉시 검사를 실시하고 간 샘플을 즉시 제거했습니다. 간 샘플의 한 부분은 분석 전까지 즉시 -20°C에 보관되었고, 다른 부분은 절제되어 10%포르말린해결책; 나머지 조직은 조직병리학적 분석을 위해 -80°C에 보관되었습니다(왕 외., 2008,수 외., 2009,니 외., 2015).

혈청 내 생화학적 매개변수 측정

간 손상은 다음을 추정하여 평가되었습니다.효소 활동키트 지침(중국 장쑤성 난징)에 따라 해당 상용 키트를 사용하여 혈청 ALT 및 AST를 측정합니다. 효소 활성은 리터당 단위(U/l)로 표시되었습니다.

MDA, SOD, GSH 및 GSH-P 측정x간 균질액에서

간 조직을 1:9 비율(w/v, 간:식염수)의 차가운 생리식염수로 균질화했습니다. 균질액을 원심분리했습니다(2500 ×g10분 동안) 후속 측정을 위해 상청액을 수집합니다. 간 손상은 MDA 및 GSH 수준뿐만 아니라 SOD 및 GSH-P의 간 측정에 따라 평가되었습니다.x활동. 이들 모두는 키트(중국 장쑤성 난징)의 지침에 따라 결정되었습니다. MDA와 GSH에 대한 결과는 단백질 mg당 nmol(nmol/mg prot)로 표시되었으며, SOD와 GSH-P의 활성은x단백질 mg당 U(U/mg prot)로 표현되었습니다.

조직병리학적 분석

새로 얻은 간의 일부를 10% 완충 용액에 고정했습니다.파라포름알데히드인산염 용액. 그런 다음 샘플을 파라핀에 묻고 3-5 μm 섹션으로 자르고 염색했습니다.헤마톡실린그리고에오신(H&E) 표준 절차에 따라 최종적으로 분석되었습니다.가벼운 현미경(티안 외., 2012).

통계분석

결과는 평균±표준편차(SD)로 표시하였다. 결과는 통계 프로그램인 SPSS Statistics, 버전 19.0을 사용하여 분석되었습니다. 데이터는 분산 분석(ANOVA,p< 0.05) 이후 Dunnett의 테스트와 Dunnett의 T3 테스트를 통해 다양한 실험 그룹의 값 사이의 통계적으로 유의미한 차이를 확인했습니다. 수준에서 유의미한 차이가 고려되었다.p< 0.05.

결과 및 토론

AEO의 구성요소

GC/MS 분석 결과, AEO에는 10분부터 35분까지 용출된 성분이 25개로 확인되었으며, 에센셜 오일의 84%를 차지하는 21개의 성분이 확인되었습니다(표 1). 휘발성 오일이 함유되어 있어모노테르페노이드(80.9%), 세스퀴테르페노이드(9.5%), 포화 비분지 탄화수소(4.86%) 및 기타 아세틸렌(4.86%). 다른 연구와 비교하여(구오 외., 2004), 우리는 AEO에서 풍부한 모노테르페노이드(80.90%)를 발견했습니다. 그 결과, AEO의 가장 풍부한 성분은 β-시트로넬롤(16.23%)인 것으로 나타났습니다. AEO의 다른 주요 성분으로는 1,8-시네올(13.9%),장뇌(12.59%),리나룰(11.33%), α-피넨(7.21%), β-피넨(3.99%),티몰(3.22%), 그리고미르센(2.02%). 화학적 조성의 변화는 식물이 노출된 환경 조건(광천수, 햇빛, 발달 단계 및 성장 단계)과 관련이 있을 수 있습니다.영양물 섭취.

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2.1. SDE의 준비

SD의 뿌리줄기는 한허브(구리, 한국)에서 건조된 약초로 구입하였다. 식물재료는 한국한의학연구원(KIOM) 최고야 박사에 의해 분류학적으로 확인되었습니다. 바우처 표본(번호 2014 SDE-6)은 한국표준약초자원표본관에 기탁되었습니다. SD의 건조된 뿌리줄기(320g)를 70% 에탄올로 2회 추출하고(2시간 환류) 추출물을 감압 하에 농축했습니다. 달인 액을 여과하고 동결건조한 후 4°C에 보관했습니다. 조 출발 물질로부터 건조된 추출물의 수율은 48.13%(w/w)였습니다.

2.2. 정량적 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC) 분석

크로마토그래피 분석은 HPLC 시스템(Waters Co., Milford, MA, USA)과 포토다이오드 어레이 검출기를 사용하여 수행되었습니다. SDE의 HPLC 분석을 위해 prim-O-glucosylcimifugin 표준품은 한국전통의약산업진흥원(경산)에서 구입하였고,초-O-글루코실하마우돌 및 4'-O-β-D-글루코실-5-O-methylvisamminol은 우리 실험실 내에서 분리되었으며 주로 NMR 및 MS에 의한 스펙트럼 분석으로 확인되었습니다.

SDE 샘플(0.1 mg)을 70% 에탄올(10 mL)에 용해시켰습니다. 크로마토그래피 분리는 XSelect HSS T3 C18 컬럼(4.6 × 250mm, 5μm, Waters Co., Milford, MA, USA). 이동상은 1.0mL/분의 유속으로 물(B)에 용해된 아세토니트릴(A)과 0.1% 아세트산으로 구성되었습니다. 다단계 그라데이션 프로그램은 다음과 같이 사용되었습니다: 5% A(0분), 5~20% A(0~10분), 20% A(10~23분), 20~65% A(23~40분) ). 검출 파장은 210-400 nm에서 스캔되고 254 nm에서 기록되었습니다. 주입량은 10.0μL. 세 가지 크로몬 측정을 위한 표준 용액을 최종 농도 7.781 mg/mL로 제조했습니다(초-O-글루코실시미푸진), 31.125mg/mL(4'-O-β-D-글루코실-5-O-메틸비사미놀) 및 31.125mg/mL(초-O-glucosylhamaudol)을 메탄올에 넣고 4°C에서 보관합니다.

2.3. 항염증 활성 평가시험관 내

2.3.1. 세포 배양 및 시료 처리

RAW 264.7 세포는 American Type Culture Collection(ATCC, Manassas, VA, USA)에서 구입하여 1% 항생제와 5.5% FBS가 포함된 DMEM 배지에서 배양했습니다. 세포를 37°C, 5% CO2의 습한 대기에서 배양했습니다. 세포를 자극하기 위해 배지를 새로운 DMEM 배지로 교체하고 지질다당류(LPS, Sigma-Aldrich Chemical Co., St. Louis, MO, USA)를 1에서 교체하였다.μSDE(200 또는 400) 존재 또는 부재 하에 g/mL를 첨가했습니다.μg/mL)을 추가로 24시간 동안 추가합니다.

2.3.2. 산화질소(NO), 프로스타글란딘 E2(PGE2), 종양 괴사 인자 측정-α(TNF-α) 및 인터루킨-6(IL-6) 생산

세포를 SDE로 처리하고 LPS로 24시간 동안 자극하였다. 이전 연구에 따르면 Griess 시약을 이용하여 아질산염을 측정하여 NO 생성을 분석하였다.12]. 염증성 사이토카인 PGE2, TNF-의 분비αIL-6은 제조업체 지침에 따라 ELISA 키트(R&D 시스템)를 사용하여 결정되었습니다. NO 및 사이토카인 생산에 대한 SDE의 효과는 Wallac EnVision을 사용하여 540 nm 또는 450 nm에서 측정되었습니다.™마이크로플레이트 리더(PerkinElmer)

2.4. 항골관절염 활성 평가생체 내

2.4.1. 동물

수컷 Sprague-Dawley 쥐(7주령)를 Samtako Inc.(대한민국 오산)에서 구입하여 12시간 명암 주기로 통제된 조건에서 사육했습니다.°C 및% 습도. 쥐에게 실험용 사료와 물을 제공했습니다.자유롭게. 모든 실험 절차는 국립보건원(NIH) 지침에 따라 수행되었으며 대전대학교 동물 관리 및 사용 위원회(대한민국 대전)의 승인을 받았습니다.

2.4.2. 쥐에서 MIA를 이용한 OA 유도

연구 시작 전에 동물을 무작위로 나누어 치료군에 배정했습니다.그룹당). MIA 용액(3mg/50μ0.9% 식염수 L)을 케타민과 자일라진의 혼합물로 유도된 마취 하에 오른쪽 무릎의 관절강 내로 직접 주사하였다. 쥐를 무작위로 4개 그룹으로 나누었습니다: (1) MIA를 주사하지 않은 식염수 그룹, (2) MIA를 주사한 MIA 그룹, (3) MIA를 주사한 SDE 처리군(200mg/kg), (4) ) 인도메타신-(IM-) 처리군(2mg/kg)과 MIA 주사. 쥐에게 MIA 주입 1주 전 4주 동안 SDE와 IM을 경구 투여했습니다. 본 연구에 사용된 SDE 및 IM의 용량은 이전 연구에서 사용된 용량을 기준으로 했습니다.10,13,14].

2.4.3. 뒷발 체중 부하 분포 측정

OA 유도 후 뒷발의 체중 부하 능력의 원래 균형이 중단되었습니다. 인캐패시턴스 테스터(Linton Instrumentation, Norfolk, UK)를 사용하여 체중 부하 허용 오차의 변화를 평가했습니다. 쥐를 조심스럽게 측정 챔버에 넣었습니다. 뒷다리에 의해 가해지는 체중 부하력은 3초 동안 평균화되었습니다. 체중분배율은 [오른쪽 뒷다리 체중/(오른쪽 뒷다리 체중 + 왼쪽 뒷다리 체중)] × 100 [15].

2.4.4. 혈청 사이토카인 수준 측정

혈액 샘플을 4°C에서 10분간 1,500g으로 원심분리했습니다. 그런 다음 혈청을 수집하고 사용할 때까지 -70°C에서 보관했습니다. IL-1의 수준β, IL-6, TNF-α, 혈청 내 PGE2는 제조업체 지침에 따라 R&D Systems(Minneapolis, MN, USA)의 ELISA 키트를 사용하여 측정되었습니다.

2.4.5. 실시간 정량적 RT-PCR 분석

TRI 시약®(Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA)을 사용하여 무릎 관절 조직에서 총 RNA를 추출하고 cDNA로 역전사한 다음 SYBR 녹색이 포함된 TM One Step RT PCR 키트(Applied Biosystems)를 사용하여 PCR 증폭했습니다. , 미국 뉴욕 주 그랜드 아일랜드). 실시간 정량 PCR은 Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR 시스템(Applied Biosystems, Grand Island, NY, USA)을 사용하여 수행되었습니다. 프라이머 서열과 프로브 서열은 표에 나와 있습니다.1. 샘플 cDNA의 분취량과 동일한 양의 GAPDH cDNA를 제조업체 지침(Applied Biosystems, Foster, CA, USA)에 따라 DNA 폴리머라제를 포함하는 TaqMan® Universal PCR 마스터 혼합물을 사용하여 증폭시켰습니다. PCR 조건은 50°C에서 2분, 94°C에서 10분, 95°C에서 15초, 60°C에서 1분으로 40주기였습니다. 표적 유전자의 농도는 제조업체 지침에 따라 비교 Ct(증폭 플롯과 역치 사이의 교차점에서의 역치 사이클 수) 방법을 사용하여 결정되었습니다.

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