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간단한 설명:

골관절염(OA)은 65세 이상 노인 인구에 영향을 미치는 장기적인 만성 퇴행성 골관절 질환 중 하나입니다.1]. 일반적으로 OA 환자는 연골 손상, 활막 염증, 연골세포 침식 등으로 진단받으며, 이로 인해 통증과 신체적 고통이 유발됩니다. [2]. 관절염 통증은 주로 염증으로 인해 관절 연골이 퇴화되어 발생하며, 연골이 심하게 손상되면 뼈가 서로 부딪혀 견딜 수 없는 통증과 신체적 어려움을 초래할 수 있습니다. [3]. 관절의 통증, 부기, 경직과 같은 증상에 염증 매개체가 관여한다는 것은 잘 알려져 있습니다. 골관절염 환자의 경우, 연골과 연골하골의 침식을 유발하는 염증성 사이토카인이 활액에서 발견됩니다. [4]. OA 환자들이 일반적으로 호소하는 두 가지 주요 증상은 통증과 활막 염증입니다. 따라서 현재 OA 치료의 주요 목표는 통증과 염증을 줄이는 것입니다. [5]. 비스테로이드성 및 스테로이드성 약물을 포함한 사용 가능한 OA 치료법은 통증과 염증 완화에 효과가 입증되었지만 이러한 약물을 장기간 사용하면 심혈관, 위장관 및 신장 기능 장애와 같은 심각한 건강 문제가 발생할 수 있습니다.6]. 따라서 골관절염 치료를 위해 부작용이 적은 더 효과적인 약물이 개발되어야 합니다.

천연 건강 제품은 안전하고 쉽게 구할 수 있다는 점에서 점점 더 인기를 얻고 있습니다.7]. 전통 한의학은 관절염을 포함한 여러 염증성 질환에 효과가 있는 것으로 입증되었습니다. [8]. Aucklandia lappa DC.는 통증을 완화하고 위장을 진정시키는 기 순환을 강화하는 것과 같은 약효로 알려져 있으며 전통적으로 천연 진통제로 사용되었습니다.9]. 이전 보고서에 따르면 A. lappa는 항염증 효과를 가지고 있는 것으로 나타났습니다.10,11], 진통제 [12], 항암제 [13], 그리고 위장 보호 [14] 효과. A. lappa의 다양한 생물학적 활성은 주요 활성 화합물인 코스투놀리드, 데히드로코스투스 락톤, 디히드로코스투놀리드, 코스투스락톤, α-코스톨, 소수레아 락톤, 코스투스락톤에 의해 발생합니다. [15]. 이전 연구에서는 코스투놀라이드가 NF-kB 및 열충격 단백질 경로 조절을 통해 대식세포를 유도하는 리포폴리사카라이드(LPS)에서 항염증 특성을 보였다고 주장합니다. [16,17]. 그러나 A. lappa의 골관절염 치료에 대한 잠재적 활성을 조사한 연구는 없습니다. 본 연구에서는 (monosodium-iodoacetate) MIA와 아세트산 유도 설치류 모델을 사용하여 A. lappa의 골관절염 치료 효과를 조사했습니다.

모노소듐 요오드아세트산(MIA)은 동물의 OA의 통증 행동과 병리생리학적 특징을 많이 생성하는 데 사용되는 것으로 유명합니다.18,19,20]. MIA는 무릎 관절에 주입되면 연골세포 대사를 교란시키고 연골 및 연골하골 침식과 같은 염증 및 염증 증상을 유발하는데, 이는 OA의 주요 증상입니다.18]. 아세트산으로 유도된 몸부림 반응은 염증성 통증을 정량적으로 측정할 수 있는 동물의 말초 통증 시뮬레이션으로 널리 간주됩니다.19]. 마우스 대식세포주인 RAW264.7은 염증에 대한 세포 반응을 연구하는 데 널리 사용됩니다. LPS로 활성화된 RAW264 대식세포는 염증 경로를 활성화하고 TNF-α, COX-2, IL-1β, iNOS, IL-6와 같은 여러 염증 매개체를 분비합니다. [20]. 본 연구에서는 MIA 동물 모델, 아세트산 유도 동물 모델 및 LPS로 활성화된 RAW264.7 세포에서 A. lappa의 OA에 대한 진통 및 항염 효과를 평가했습니다.

2. 재료 및 방법

2.1. 식물 재료

실험에 사용된 옻나무(A. lappa DC.) 건조 뿌리는 에풀립제약(서울, 대한민국)에서 구입했습니다. 가천대학교 한의과대학 한약약리학과 이동훈 교수가 동정하였으며, 검체번호는 18060301로 기탁했습니다.

2.2. A. lappa 추출물의 HPLC 분석

A. lappa는 환류 장치(증류수, 100°C에서 3시간)를 사용하여 추출했습니다. 추출된 용액을 여과하고 저압 증발기를 사용하여 농축했습니다. A. lappa 추출물은 -80°C에서 동결 건조 후 44.69%의 수율을 보였습니다. A. lappa의 크로마토그래피 분석은 1260 InfinityⅡ HPLC 시스템(Agilent, Pal Alto, CA, USA)을 사용하여 HPLC에 연결하여 수행했습니다. 색차 분리를 위해 EclipseXDB C18 컬럼(4.6 × 250 mm, 5 µm, Agilent)을 35°C에서 사용했습니다. 총 100 mg의 검체를 50% 메탄올 10 mL에 희석하고 10분간 초음파 처리했습니다. 샘플은 0.45 µm의 주사기 필터(Waters Corp., Milford, MA, USA)로 여과했습니다. 이동상 조성은 0.1% 인산(A)과 아세토니트릴(B)이었고, 컬럼 용출은 다음과 같이 진행되었다: 0~60분, 0%; 60~65분, 100%; 65~67분, 100%; 67~72분, 용매 B 0%, 유속 1.0 mL/min. 유출액은 10 μL의 주입량을 사용하여 210 nm에서 관찰되었다. 분석은 3회 반복 수행되었다.

2.3. 동물 사육 및 관리

영어: 5주령의 수컷 Sprague-Dawley(SD) 쥐와 6주령의 수컷 ICR 마우스를 Samtako Bio Korea(경기도, 한국)에서 구입했습니다. 동물은 일정한 온도(22±2°C)와 습도(55±10%) 및 12/12시간의 명암 주기를 사용하는 방에서 사육했습니다. 동물은 실험을 시작하기 전 일주일 이상 이러한 환경에 익숙해지도록 했습니다. 동물은 사료와 물을 자유롭게 공급받았습니다. 모든 동물 실험 절차에서 가천대학교의 동물 관리 및 취급에 대한 현재 윤리 규칙(GIACUC-R2019003)을 엄격히 준수했습니다. 이 연구는 연구자 맹검 및 평행 시험으로 설계되었습니다. 우리는 동물 실험 윤리 위원회의 지침에 따라 안락사 방법을 따랐습니다.

2.4. MIA 주사 및 치료

쥐를 무작위로 위약군, 대조군, 인도메타신군, 그리고 아데노박테리움 라파(A. lappa)의 네 군으로 나누었습니다. 2% 이소플루오렌 O2 혼합액으로 마취한 후, 50 μL의 MIA(40 mg/m2; Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA)를 무릎 관절 내 주사하여 실험적 골관절염(OA)을 유도했습니다. 처리는 다음과 같이 진행되었습니다. 대조군과 위약군은 AIN-93G 기본 식이만 제공했습니다. 인도메타신군은 AIN-93G 식이에 인도메타신(3 mg/kg)을 첨가하여 제공했고, 아데노박테리움 라파(A. lappa) 300 mg/kg 군은 AIN-93G 식이에 아데노박테리움 라파(300 mg/kg)를 첨가하여 제공했습니다. 치료는 OA 유도일부터 24일 동안 체중 190~210g당 15~17g의 비율로 매일 계속되었습니다.

2.5. 체중 지지 측정

OA 유도 후, 예정대로 incapacitance-MeterTester600(IITC Life Science, Woodland Hills, CA, USA)을 사용하여 쥐의 뒷다리 체중부하능력을 측정했습니다. 뒷다리의 체중 분포를 다음과 같이 계산했습니다: 체중부하능력(%)

FOB 가격:0.5~9,999달러/개

최소 주문 수량:100개/개

공급 능력:월 10000개/개

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제품 상세 정보

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골관절염(OA)은 연령 관련 관절 질환으로, 노인에서 가장 흔한 퇴행성 골 질환 중 하나입니다. 현재 사용되는 비스테로이드성 항염증제(NSAID)와 스테로이드에 의존하는 골관절염 치료 전략은 효과가 입증되었음에도 불구하고 위장관, 심혈관계, 신장 질환과 관련이 있는 경우가 많습니다. 오클랜드아랍파(Aucklandia lappa)는 잘 알려진 전통 의약품입니다. 오클랜드아랍파의 뿌리는 여러 가지 생리활성 성분을 함유하고 있으며, 뼈 질환 및 기타 건강 문제의 천연 치료제로 사용되어 왔습니다. 본 연구에서는 오클랜드아랍파 뿌리 추출물이 천연 치료제로서 골관절염 진행에 미치는 영향을 평가했습니다. 오클랜드아랍파는 아세트산으로 유도된 생쥐의 몸부림 횟수를 상당히 감소시켰습니다. 실험적 골관절염을 유도하기 위해 쥐의 무릎 관절을 통해 요오드아세트산나트륨(MIA)을 주입하였는데, 이는 인간의 골관절염과 유사한 병리학적 특성을 보였습니다. A. lappa는 MIA로 유발된 뒷다리의 체중 부하를 상당히 감소시키고 MIA 쥐의 연골 침식을 역전시켰습니다. OA의 대표적인 염증 매개체인 IL-1β 또한 A. lappa에 의해 MIA 쥐의 혈청에서 현저하게 감소되었습니다. 시험관 내 실험에서, A. lappa는 LPS로 활성화된 RAW264.7 대식세포에서 NO 분비를 감소시키고 IL-1β, COX-2, IL-6, iNOS 생성을 억제했습니다. 진통 및 항염증 효과를 바탕으로, A. lappa는 OA에 대한 잠재적 치료제가 될 수 있습니다.